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 化學(xué)合成多肽凍干粉如何溶解？

  溶解多肽是非常復(fù)雜的事情，一般很難一下子確定合適的溶劑。通常是先取一點(diǎn)試驗(yàn)，在沒(méi)有確定合適的溶劑前千萬(wàn)不要全部溶解。

    下列方法有助于您選擇合適的溶劑：

(1) 判定多肽的電荷特定，設(shè)定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1;堿性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1,其它氨基酸的電荷為0。計(jì)算出將電荷數(shù)。

(2) 如果凈電荷數(shù)>0，多肽為堿性，用水溶解：如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸(10%以上);如果多肽還不能溶解，加入少量TFA(25ul)溶解，然后加入500ul水稀釋。

(3) 如果凈電荷數(shù)<0，多肽為酸性，用水溶解;如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然后加入500ul水稀釋。

(4) 如果凈電荷數(shù)=0，多肽為中性，含有大量不帶電荷的極性氨基酸殘基或疏水性氨基酸的疏水性多肽和中性多肽可先溶解于少量有機(jī)溶劑中，如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或異丙醇，然后加水(蒸餾水)稀釋。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不能用DMSO溶解，因?yàn)?/span>DMSO可能造成側(cè)鏈氧化。還有人建議需要尿素來(lái)溶解。對(duì)于含有自由半胱氨酸的肽，需使用DMF而不是DMSO。對(duì)于疏水性很大的多肽，可添加6M鹽酸胍或8M尿素，然后進(jìn)行必要的稀釋。

為了防止或盡量減少多肽降解，請(qǐng)將多肽以凍干粉形式保存在-20°C或更低溫度更佳。如果需要保存溶液肽，最好分成小樣存放，以避免反復(fù)凍融。一份樣品融凍后未用完，應(yīng)扔掉。細(xì)菌降解有時(shí)會(huì)成為溶液肽的麻煩，所以請(qǐng)將肽溶于無(wú)菌水或肽溶液過(guò)濾除菌。

堿性氨基酸:Lys(K),  Arg(R), His (H) , Orn

酸性氨基酸: Asp(D),  Glu(E),

化學(xué)合成多肽凍干粉如何溶解？